細(xì)胞培養(yǎng)中，很容易發(fā)生支原體污染，而常見的青鏈霉素等大多數(shù)的抗生素對支原體又無效。因此選對一款有效且無需長期使用的支原體祛除劑，對于挽救污染細(xì)胞可以起到?jīng)Q定性作用。

以往發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)的細(xì)胞中存在支原體污染時，應(yīng)立即終止實(shí)驗(yàn)，全部丟掉被污染的細(xì)胞，以避免支原體污染的擴(kuò)散。而對于費(fèi)力擴(kuò)增的細(xì)胞（如已轉(zhuǎn)染，或經(jīng)過體外刺激），如果細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)有支原體污染，但此細(xì)胞又不愿丟棄，希望繼續(xù)培養(yǎng)，又怎么辦呢？

這里向您推薦祛除細(xì)胞支原體污染的一種方法，其中要用到德國MB公司生產(chǎn)的專li復(fù)合抗生素Zell Shield®。

Zell Shield®特點(diǎn)

1) 高效廣譜

Zell Shield®通過同時阻止支原體、霉菌、酵母、細(xì)菌增殖過程中DNA及蛋白的合成，有效抑制上述微生物的增殖。

2) 安全

無細(xì)胞毒性，專li復(fù)合支原體敏感抗生素，對大多數(shù)細(xì)胞株無毒。

3) 活性穩(wěn)定

在細(xì)胞培養(yǎng)期間，Zell Shield®始終保持穩(wěn)定的活性。

4) 使用方便

Zell Shield®為無菌溶液，可直接加入培養(yǎng)基使用。

二、懸浮沖洗法 + Zell Shield®祛除支原體污染

據(jù)研究表明，約98％的支原體存在于細(xì)胞表面和細(xì)胞間隙。支原體直徑約180~350nm，比細(xì)胞小很多，經(jīng)低速離心可與細(xì)胞分離。通過反復(fù)懸浮沖洗細(xì)胞、離心，加上使用Zell Shield®，即可在細(xì)胞培養(yǎng)四代以內(nèi)有效地祛除支原體。

具體流程如下圖：

要點(diǎn)歸納：

1. 每次傳代時，重復(fù)三次對細(xì)胞懸浮沖洗步驟非常重要，操作要正確、規(guī)范，以達(dá)jia效果！

2. 在培養(yǎng)基中加入1％Zell Shield®，抑制支原體增殖！

3. 使用安全的血清、培養(yǎng)基等試劑，不再有新的支原體加入！

只要如法操作，即傳代時懸浮沖洗，并且用含Zell Shield®的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞四代后，細(xì)胞中的支原體即可祛除。希望以上方法能給你帶來幫助。